CNMP 42-150/2008-2011

Cercetari interdisciplinare privind solutionarea unor noi aspecte de antibiorezistenta cu implicatii majore in patologia chirurgicala cardiovasculara si gastroenterologica

Cod identificare proiect: CNMP 42-150/2008-2011

Titlul proiectului: Cercetari interdisciplinare privind solutionarea unor noi aspecte de antibiorezistenta cu implicatii majore in patologia chirurgicala cardiovasculara si gastroenterologica.

Coordonatorul proiectului: INCDMI Cantacuzino, Bucuresti, Director de proiect: Dr. Israil Michaela-Anca CS I Institut Cantacuzino Bucuresti

Parteneri de consortiu:

P1- Clinica I Chirurgicala a Spitalului Universitar Bucuresti, Responsabil de proiect: Prof. dr. Radu Palade

P2- Institutul de Boli Cardiovasculare Prof. C.C.Iliescu, Responsabil de proiect dr. biol. Otilia Banu

P3- Catedra de Microbiologie de la Facultatea de Biologie a Universitatii Bucuresti, Responsabil de proiect: prof. dr. Grigore Mihaescu

Scopul proiectului: investigarea cu ajutorul  metodelor  complexe fenotipice si molecular genetice a unor mecanisme noi de AR de importanta globala pentru stabilirea si validarea unor metode optimizate de detectare corecta si cit mai precoce a AR in laboratorul clinic, in scopul implementarii finale a antibioterapiei tintite in infectiile chirurgicale abordate.

 

Obiective generale si specifice ale proiectului:

Obiectiv general: studiul complex la nivel fenotipic, genotipic si clinic al unor aspecte noi de AR semnalate in practica medicala chirurgicala,  in scopul optimizarii si eficientizarii antibioterapiei  in serviciile de chirurgie  gastroenterologica si cardiovasculara

Obiective specifice:

Obiectiv specific 1. Stabilirea paletei de etiologii si a frecventei tulpinilor microbiene implicate in etiologia infectiilor bacteriene in chirurgia gastroenterologica si cardiovasculara;

Obiectiv specific 2. Determinarea frecventei unor mecanisme noi de AR la tulpinile aerobe si respectiv anaerobe, izolate din infectii abdominale, si respectiv hemoculturi si dispozitive cardiovasculare;

Obiectiv specific 3. Reactualizarea break-point-urilor (CMI, zone de inhibitie a cresterii microbiene) si cut-off-urilor tulpinilor bacteriene implicate in patologia infectioasa chirurgicala in scopul instituirii unor metode optimizate de detectare corecta si precoce a AR la nivel de laborator clinic;

Obiectiv specific 4. Implementarea rezultatelor obtinute in clinicile de chirurgie partenere si analiza oportunitatilor de extrapolare a rezultatelor obtinute in alte unitati spitalicesti cu profil similar

Etapele de realizare

ETAPA I- febr.  2009Demararea recoltarii intraoperatorii Demararea izolarii si identificarii Demararea determinarii fenotipice a factorilor de virulenta Demararea determinarii experimentale a rezistentei fenotipice (recalcitranta) a biofilmelor ETAPA II- dec. 2009 Continuarea recoltarii intaoperatorii Continuarea izolarii si identificarii Caracterizarea fenotipica a factorilor de virulenta si antibiorezistenta Determinarea CMI, break point-urilor si cut-off-urilor Urmarirea evolutiei clinice a bolnavilor ETAPA III- dec. 2010 Determinarea fenotipica de AR si a factorilor de virulenta Determinarea experimentala a rezistentei fenotipice (recalcitranta) a biofilmelor Biologie moleculara AR si factori de virulenta Determinarea CMI, break point-uri lor si cut-off-urilor Baza de date electronica si portal web ETAPA IV- august 2011 Continuarea recoltarii Continuarea izolarii si identificarii Determinarea fenotipica AR si a factorilor de virulenta, inclusiv determinarea experimentala a rezistentei fenotipice (recalcitranta) a biofilmelor Biologie moleculara AR Determinarea CMI, break point-uri si cut-off-urilor Urmarirea evolutiei clinice a bolnavilor sub tratament Baza de date electronica si portal web

 

Rezumatul proiectului

Proiectul a studiat aspecte fenotipice si moleculare ale factorilor de virulenta (FV) si de antibiorezistenta (AR), la tulpinile bacteriene izolate din infectii asociate chirurgiei cardiovasculare si respectiv cazurilor clinice de urgente chirurgicale abdominale.

In cazul infectiilor asociate chirurgiei cardiovasculare a fost demonstrat  riscul inalt al colonizarii cu tulpini nosocomiale de origina duala: exogena (comunitara) si endogena cu predominanta  Gram (-) nonfermentativi (Ps. aeruginosa) urmati de Enterobacteriaceae, microbiota  dublata permanent de  prezenta  infectiilor cu Candida. A fost evidentiata o incidenta crescuta a rezistentei (R) la beta-lactamice, aminoglicozide, quinolone. S-a demonstrat experimental AR crescuta a celulelor bacteriene din biofilme fata de celulele planctonice, pattern-urile de colonizare fiind influentate de structura suprafetelor si compozitia chimica a materialelor protetice, cit si de specia de bacterii colonizatoare.

In cazul infectiilor asociate cu urgentele chirurgicale abdominale s-au izolat predominant bacterii de origine endogena cu frecventa cea mai inalta fiind Enterobacteriaceaele si  tulpinile anaerobe Gram (-).

Prevalenta tulpinilor bacteriene, cit si a FV in cazuri clinice apartinind grupurilor cu nivel de risc ridicat a demonstrat ca agresiunea bacteriana este influentata  evident  de virsta pacientilor, statusul  imunitar, co-morbiditati, contactul cu mediu spitalicesc si antibioterapiile  repetate, care au favorizat selectarea de tulpini rezistente, toate aceste aspecte conducind la procese infectioase complexe severe.

Studiul gradului de eficienta a antibioticelor  cu spectru larg, din grupul celor folosite in terapia empirica pre-operatorie a demonstrat o departajare evidenta,  a unui grup de  antibiotice ramase eficiente si a unui al doilea grup de antibiotice  fata de care a fost evidentiata emergenta  unei populatii bacteriene  rezistente, aspect ce reprezinta un semnal de alarma si care pledeaza pentru necesitatea instituirii in viitor, a unui  control  periodic  al eficientei antibioticelor din respectiva  trusa de tratament empiric preoperator cu reajustarea acesteia in conformitate cu noile aspecte de AR semnalate.

Valorificarea si diseminarea rezultatelor 2009-2010:

1. 1. Lucrari  prezentate  la Congrese Internationale:

C.Delcaru (Larion), C.M.Chifiriuc, C.Bleotu, R.S.Palade, D.Vasile, D.Voiculescu, D.Davitoiu, T.Nastasescu, H.Roman, I.Caplan, A.Ilco, M.Tomescu, A.M. Israil. Hallmarks of some bacterial strains isolated in surgical abdominal emergencies. FEMS 2009 3-rd Congress of European Microbiologists, Gothenburg Sweeden, 28 July, 2, p 84, P 17

.Lucrari publicate in volume de conferinte internationale cu cenzori:

Otilia Banu, Carmen Mariana Chifiriuc, Veronica Lazǎr, Tatiana Sesan, Coralia Bleotu. Study of the relationship between infectious agents of cardiovascular diseases, prosthetic devices and eukaryotic cell. SOMED Congress, Greece, 3-12 Sept 2010

2. Articole acceptate pentru publicare in reviste medicale ISI:

Anca –Michaela Israil, Cristina Delcaru, R.S. Palade, Carmen Chifiriuc, Carmen Iordache, D.Vasile,

M. Grigoriu, D. Voiculescu. Bacteriological Aspects Implicated in Abdominal Surgical Emergencies.    Articol  acceptat la revista “ Chirurgia” nr.6,  2010 (in press)

Study of the relationships between bacterial strains isolated from biofilm associated cardiovascular infections, prosthetic devices and the eukaryotic cell. Otilia Banu, Carmen Mariana Chifiriuc, Coralia Bleotu, Veronica Lazǎr (in press- Anaerobic).

3. Lucrari publicate in volume de conferinte nationale cu cenzori:

3.a. Delcaru Cristina, Carmen-Mariana Chifiriuc, Anca Israil.Optimizarea unor metode de testare a sensibilitatii la antibiotic la bacteriile anaerobe implicate in patologia tubului digestiv. Sesiunea Biologilor din Romania, 24-25 octombrie 2009, si publicata in Revista Romana de Laborator Clinic anul IV, nr.16, nov.2009, p.36

3.b. Cristina Delcaru, Carmen-Mariana Chifiriuc, Anca Israil. Aspecte privind standardizarea metodelor de testare a sensibilitatii la antibiotic a bacteriilor anaerobe implicate in patologia tubului digestiv. Simpozionul thematic 18 noiembrie 2009, Ziua Europeana a Informarii despre Antibiotice p.17

4. Comunicari:

Cristina Delcaru (Larion), Anca Israil. Izolarea, identificarea si caracterizarea spectrului de antibiosensibilitate la antibiotice a bacteriilor anaerobe implicate in patologia tractului digestiv.

Sesiunea de Comunicari Stiintifice a Facultatii de Biologie 22 mai 2009.

1. 5. Referate sustinute  in cadrul stagiului de doctorat:

Delcaru (Larion) Cristina:

1. a. Principalele specii bacteriene oportuniste implicate in patologia infectioasa a tractului digestiv (referat sustinut 24 febr.2010)
2. b. Factori de patogenitate si virulenta  implicati in mecanismul de patogeneza a principalilor

agenti infectiosi anaerobi enterali (referat sustinut 22 septembrie 2010)

Lucrare doctorat in stiinte biologice (in lucru)

Ani Ioana Cotar- teza de doctorat sustinuta la 13 Nov. 2009- Implicatiile fenomenului de QS si raspuns in exprimarea coordonata a factorilor de patogenitate si virulenta la tulpini de S. aureus si Ps. aeruginosa

Otilia Banu- teza de doctorat sustinuta la 27 mai 2010- Studiul interrelatiilor agentilor infectiosi – celula eucariota si dispozitivele protetice in patologia infectiilor cardiovasculare

Delcaru (Larion) Cristina: Patologia infectioasa a tractului digestiv; aspecte  noi privind

proprietatile de virulenta si antibiorezistenta ale agentilor infectiosi implicati.

Carmen Iordache:  Studiul interactiunii mediatorilor solubili produsi de Ps. aeruginosa cu celula gazda eucariota